患者男，25岁。7天前发现阴茎冠状沟处一黯红色斑疹，皮疹逐渐增大高起呈无痛性炎性丘疹，后皮疹表面坏死形成溃疡。体检发现：阴茎冠状沟见1.5cm大小溃疡，椭圆形，无触痛，境界清楚，周边水肿隆起，基底呈肉红色，触之具有软骨样硬度，表面有浆液性分泌物。患者发病前3周有不洁性交史。下列检查最有诊断价值的是

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