为了阐明miR-101抑制乳腺癌侵袭转移的分子机制和发现miR-101新的靶标基因,有研究人员在前期研究中采用SILAC定量蛋白质组学高通量策略分析了miR-101转染乳腺癌细胞MCF-7前后细胞内蛋白质表达水平的差异,即将miR-101转染13C6-Lys(重核素)标记的MCF-7细胞、NC miRNA(阴性对照)转染12C6-Lys (轻核素)标记的MCF-7细胞,按两者细胞总蛋白等量混合,然后经SDS-PAGE分离和LTQ-Orbitrap质谱鉴定与定量分析,总共鉴定出200种差异表达的蛋白质分子,
- A: 这200种差异表达的蛋白质肯定都是表达下调的
- B: 差异表达的蛋白质是由于miR-101通过mRNA降解或抑制其翻译而导致了蛋白质表达水平下调的
- C: 这200种差异表达的蛋白质的mRNA都应该可以用miRNA靶标预测软件miRanda和Targetscan预测出来
- D: 由于细胞培养过程中的稳定核素标记技术(SILAC)本身的不足,而遗漏一些差异表达的蛋白质
- E: 最后仅得到5个受miR-101调控的靶标基因
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